Spectrophotométrie Bleu De Méthylène
‐ A quelle longueur d'onde vaut‐il mieux suivre la réaction? ‐ Quelle est la valeur du coefficient d'absorption du BBP à cette longueur d'onde? Vous n'oublierez pas de mettre en œuvre les bonnes pratiques de manipulation vues lors de ce TPcours! MANIPULATION 1. Préparer le spectrophotomètre pour les mesures: • Régler la longueur d'onde d'absorption • Effectuer le zéro d'absorbance 2. Introduire à la pipette dans une fiole jaugée de 50 mL 2 mL de solution aqueuse de bleu de bromophénol (de concentration massique 0, 4 g. L‐1) et étendre à 50 mL avec une solution d'hydroxyde de sodium (de concentration CB=1, 4 mol. TP‐COURS : ÉTUDE CINETIQUE DE DECOMPOSITION DU BLEU. L‐1). 3. Déclencher le chronomètre. 4. Homogénéiser la solution et commencer rapidement les mesures. Vous effectuerez une mesure d'absorbance toutes les 2 à 3 minutes jusqu'à ce que l'absorbance initiale soit divisée par 10 (ou au maximum pendant 1 heure). Remplir un tableau excel (ou une table de votre calculatrice) au fur et à mesure de la réaction précisant le temps (en min) et l'absorbance.
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Choix de la longueur d'onde. La mesure doit être faite à un maximum d'absorption. En effet, en cas de dérive de l'instrument (la longueur d'onde demandée n'est pas la longueur d'onde effectivement utilisée par le spectromètre) ou de modification du spectre (dont la forme dépend, en toute rigueur, de facteurs comme la température, la force ionique, la nature du solvant, la nature d'autres molécules présentes... ), l'erreur sur la mesure de l'absorbance A est minimisée si. Il faut donc se reporter au spectre de la molécule étudiée pour déterminer la longueur d'onde de travail. Spectrophotométrie bleu de méthylène c. Plusieurs sources d'informations sont exploitable pour connaître l'allure du spectre de l'espèce étudiée: Certains spectres sont disponibles dans la littérature scientifique, par exemple: Plusieurs règles synthétisent les relations entre la structure des molécules et leur propriétés UV-vis: il s'agit notamment des règles de Woodward et Fieser. Dans le domaine du visible, la couleur des espèces est un premier indice sur leur longueur d'onde d'absorption: la solution apparaît colorée, c'est qu'elle absorbe la lumière de la couleur complémentaire, c'est-à-dire la couleur diamétralement opposée sur le cercle chromatique.
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Méthémoglobinémies Traiter si présence de symptômes et/ou méthémoglobinémie > 30%. Spectrophotométrie bleu de méthylène coloration. Dans les autres cas, l'évolution est favorable en 24 à 72 heures, sans traitement. Oxygène pur (FiO 2 100%) Permet de saturer l'hémoglobine normale, d'augmenter l'O 2 dissous: masque, sonde nasale, intubation, ventilation artificielle, suivant l'état clinique du patient. Suivant le mode d'intoxication Décontamination cutanée soigneuse (eau et savon) et/ou lavage gastrique et charbon activé. Antidote: bleu de méthylène En cas d'échec du traitement antidotique, penser à: Une méthémoglobinémie héréditaire (exceptionnelle: déficit en méthémoglobine-réductase, hémoglobine anormale) Un déficit en G6PD Dans ces cas seulement, la vitamine C (500 mg/j) peut être utile.